WWW.DIS.KONFLIB.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 
<< HOME
Научная библиотека
CONTACTS

Pages:     | 1 |   ...   | 15 | 16 || 18 | 19 |   ...   | 22 |

5 9 3 минаева любовь валерьевна ^/-/emaci^cl^ эксперртментальная оценка роли изменений системы глутатиона в реализации побочных цитотоксических эффектов повторного введения цржлофо

-- [ Страница 17 ] --

Рис. 10. Морфологическая карт1ша тканей печени в группе интактных жи­ вотных. Окраска гематоксилин-эозином. 250х Рис. 11. Морфологическая картина ткани печени в группе животных при по­ вторной интоксикации ЦФ в дозе 20 мг/кг в течение 10 дней без фармакологиче­ ской коррекции. Окраска гематоксилин-эозином. 250х Рис. 12. Морфологическая картина ткани печени в группе животных при по­ вторном введении ЦФ на фоне применения ацетилцистеина. Окраска гематокси­ лин-эозином. 250х Рис. 13. Морфологическая картина ткани печени в группе животных при по­ вторном введении ЦФ на фоне применения глутоксима. Окраска гематоксилинэозином. 250х

ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

Проведенное экспериментальное исследование, направленное на изу­ чение особенностей обмена глутатиона и интенсивности протекания процес­ сов ПОЛ в тканях печени, почек, головного мозга и эритроцитах лаборатор­ ных животных при повторных введениях ЦФ в малых дозах, позволяет гово­ рить о вовлечении изменений данной биохимической системы в механизмы повреждения клеток при повторных интоксикациях алкилирующими ядами.

Анализ полученных результатов указывает на тесную связь изменений изучаемых биохимических показателей в исследуемых органах с величиной используемой дозы ЦФ, длительностью введения, участия ткани в метабо­ лизме ксенобиотика и межтканевых особенностей обмена глутатиона.

При изучении изменений концентрации ВГ в условиях повторных введений ЦФ в ткани печени был выявлен ряд характерных особенностей. ^ При повторном введении различных доз токсиканта наблюдался двухфазный характер изменений концентрации ВГ. В начальном периоде эксперимента!.' (1-5 суток), длительность которого была обратно пропорциональна величине дозы, отмечалось компенсаторное увеличение концентрации ВГ по сравне­ нию с контрольной группой животных, а в дальнейшем имела место тенден­ ция к снижению уровня данного показателя в период истощения ресурсов системы глутатиона. После введение ЦФ в дозе 20 мг/кг максимальное уве­ личение концентрации ВГ на 23,2% (р0,05) выше значений интактного контроля отмечалось на 5 сутки компенсаторного периода, введение боль­ шей дозы привело к сокращению длительности компенсаторного периода и максимальному повышению уровня ВГ на 3 сутки эксперимента на 23,1% (р0,05).

Данные изменения носили дозозависимый характер и предполагают связь с особенностями тканевого обмена глутатиона.

в настоящее время истощение уровня ВГ в гепатоцитах при острых отравлениях ЦФ в высоких дозах отмечается многими исследователями [18,31,92,105,106,156,157]. К снижению уровня ВГ может приводить его рас­ ходование на процессы конъюгации с ксенобиотиком и его метаболитами, наиболее интенсивно протекающими в тканях этого органа, при этом увели­ чение дозы вводимого ксенобиотика приводит к предельному напряжению системы детоксикации.

В отличие от острой интоксикации высокими дозами, повторное вве­ дение ЦФ сопровоясдается развитием длительного «токсического стресса», характеризующегося постепенной мобилизацией, а затем расходованием адаптационных резервов системы глутатиона. За периодом напряжения адаптивных процессов следует период компенсации, направленный на вре­ менное возмещение поврежденных функций системы глутатиона в процессе интоксикации. При этом, если действие токсиканта продолжается, наступает срыв компенсации [20].

Подтверждением этого может служить двухфазный характер измене-;| НИИ, который отмечался и при исследовании активности ряда ферментов системы глутатиона. Введение ЦФ в дозах 20 (40) мг/кг сопровождалось по-, вышением активности ГР в течение 3 (1) суток с последующим достоверным ее падением. При введении токсиканта в меньшей дозе активность П по­ степенно нарастала в течение 5 суток исследования, превысив значения контрольной группы в 1,61 раза (р0,05). При применении ЦФ в дозе мг/кг нарастание активности этого фермента наблюдалось в течение 1 суток в 1,44 раза (р0,05) выше значений контроля с последующим значительным ее снижением. При исследовании ГП и каталазы компенсаторная активация этих ферментов в ткани печени наблюдалась на 5 сутки эксперимента при использовании дозы токсиканта 20 мг/кг (в 1,37 и 1,30 раза) (р0,05) в те­ чение 1-3 суток при введении большей дозы в 1,14, 1,23 раза (р0,05), со­ ответственно, выше показателей интактной группы.

Однако при исследовании активности Г-6-Ф-ДГ в ткани печени перио­ да компенсаторных изменений выявлено не было. Напротив, на протяжении всего периода эксперимента наблюдалось достоверное выраженное дозозависимое ее снижение.

Рассматривая механизмы детоксикации ксенобиотиков, можно отме­ тить, что их протекание определяется состоянием:

- микросомальных монооксигеназ и фосфолипидов мембран цитоплазматической сети;

- конъюгирующих агентов и ферментов реакций конъюгации;

- макроэргических соединений, необходимых для синтеза белковферментов и реакций конъюгации;

- ферментативных и неферментативных механизмов антирадикальной -антиперекисной защиты.

Таким образом, нормальное функционирование системы детоксикации ЦФ тесно связано с глюкозо-6-фосфатдегидрогеназной реакцией, как основ­ ного поставщика восстановленных эквивалентов (НАДФН). В связи с этим, именно активность Г-6-Ф-ДГ может явиться лимитирующим фактором дан­ ного процесса [71,99,154].

Полученные данные о динамике изменений активности этого фер­ мента можно объяснить его структурными особенностями - наличием в ак­ тивном центре фермента сульфгидрильной группы. Поэтому снижение ак­ тивности Г-6-Ф-ДГ при повторном отравлении ЦФ может быть связано с необратимым алкшшрованием тиоловых групп энзима активными метаболи­ тами ЦФ [20] и повреждающим действием на молекулы фермента АФК и свободных радикалов. В свою очередь, усиленное расходование НАДФ-Н в глутатион-редуктазной и цитохром Р-450-редуктазной реакциях [22,70] усу­ губляет процессы истощения резервов компенсаторного ответа системы глутатиона. Подтверждением роли активации СРО и алкилирования SH-rpynn в снижении Г-6-Ф-ДГ активности может служить глубокое снижение концен­ трации сульфгидрильных групп и повышение уровня ДК, МДА в ткани пе­ чени.

Известно, что процесс биотрансформации ЦФ под действием микросомальных монооксигеназ сопровождается образованием супероксидных анионов, а затем перекиси водорода и органических гидроперекисей [8,9] Антиоксидантные ферменты прямого действия, такие как СОД и каталаза, непосредственно удаляют из окружающего пространства АФК. Но су­ ществуют и альтернативные пути, позволяющие клеткам «шунтировать» об­ мен АФК, посредством которых удаляются биологически активные электрофильные интермедиаты. Центральное место в этой стратегии принадлежит редокс-циклу глутатиона, а также системе глутатионовои конъюгации [25,79,144].

ROOH Рис. 14. Редокс-цикл глутатиона [22].

Редокс-цикл глутатиона принимает участие в обезвреживании как пе­ рекисей, так и органических гидроперекисей. Однако, для развития «окисли­ тельного» стресса важна не столько концентрация ВГ и других восстанови­ тельных эквивалентов клетки, но и редокс-статус системы, то есть соотно­ шение между про- и антиоксидантными молекулами, а также между скоро­ стями окислительно-восстановительных превращений различных ее компо­ нентов [74,124].

В проведенном эксперименте выявлено, что несмотря на метаболиче­ скую активацию ферментов антиоксидантной защиты в начале эксперимен­ та, происходит нарастание содержания продуктов ПОЛ, связанное, по- ви­ димому, с недостаточностью восстановленных эквивалентов. Об активации процессов ПОЛ свидетельствовало накопление как начальных продуктов ПОЛ - ДК, так и конечных - МДА. Необходимо отметить, что соединения типа диеновых конъюгатов обладают высокой реакционной способностью и существуют в тканях весьма ограниченное время, быстро подвергаясь по­ следующим превращениям. Поэтому накопление первичных продуктов ПОЛ (ДК), по мнению некоторых авторов, не в полной степени отражает процессы пероксидации in vivo [14]. Более корректным показателем в этом отношении считается определение уровня МДА, когда в ходе реакции опре­ деляется не только количество самого МДА, но и его предшественников ти­ па перекисей и гидроперекисей, которые при нагревании в кислой среде раз­ лагаются с образованием МДА, вступающего в дальнейшую реакцию с ТБК[155].

При повторном введении различных доз токсиканта в ткани печени происходило накопление обоих продуктов, причем повышение концентра­ ции МДА было более выраженным. При этом усиление протекания процес­ сов ПОЛ имело отчетливый дозозависимый характер.

Действительно, повторное введение ЦФ в дозах 20 и 40 мг/кг вызыва­ ло достоверное повышение концентрации ДК по мере нарастания кумуля­ тивного эффекта ЦФ в ткани печени на 10 и 7 сутки эксперимента в 2,03, 2,52 раза (р0,05) и МДА в 1,61, 2,12 раза (р0,05) по сравнению с показате­ лями интактной группы.

Высокая алкилирующая способность метаболитов ЦФ, образующихся в процессе активации системой цитохрома Р-450, лежит в основе их взаимо­ действия не только с ВГ, но и с функциональными (в том числе и с сульфгидрильными) группами различных биомолекул [20]. Процессы обратимого S-тиолирования функциональных групп белков окисленным глутатионом и образование смешанных дисульфидов также может приводить к снижению содержания СГ [43]. Последнее изменение имеет неоднозначное значение:

во-первых, сохранение в клетке пула глутатиона; во-вторых, защита SHгрупп белков от необратимой их модификации как продуктами метаболизма ЦФ, так и свободными радикалами и продуктами ПОЛ. В литературе описа­ на ранняя и распространенная реакция окислительной модификации белков путем образования или неправильного перезамыкания дисульфидов, состав­ ленных аминокислотными остатками цистеина [100,101,102]. Глутатион посредством протеиндисульфидизомераз и тиолтрансфераз способен обес­ печить быструю и эффективную "репарацию" этих повреждений. Таким образом, система глутатиона принимает участие в защите тиольных групп различных белков и сохранении активности ряда ферментов [135,161]. Но в условиях дефицита ресурса глутатиона, в значительном количестве расхо­ дуемому на процессы конъюгации, закономерно нарушение тиолового ста­ туса.

В ходе проведенного исследования было выявлено снижение содержа­ ния СГ в ткани печени на протяжении всего эксперимента, а максимальное его проявление отмечалось в момент срыва компенсаторных ресурсов сис­ темы глутатиона - после повторного введения ЦФ в дозе 20 мг/кг на 10 су­ тки исследования в 1,17 раза (р0,05) ниже контроля, при использовании большей дозы на 7 сутки исследования - в 1,20 раза (р0,05). Приведенные данные могут свидетельствовать и о том, что часть сульфгидрильных групп тканевых белков необратимо алкилируется активными метаболитами ЦФ, а не подвергается тиолированию окисленным глутатионом. Это можно объяс­ нить тем, что процессы микросомального окисления в клетках печени, повидимому, происходят более активно, чем глутатионовая конъюгация, и часть метаболитов ЦФ не успевает конъюгировать с ВГ и взаимодействует с СГ белков, что приводит к нарушению активности ряда ферментов в клет­ ке.



Pages:     | 1 |   ...   | 15 | 16 || 18 | 19 |   ...   | 22 |
 


Похожие материалы:

« ЛАРИОНОВ АЛЕКСЕЙ ВИКТОРОВИЧ РАЗНООБРАЗИЕ СТЕПНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ НА ГРАДИЕНТЕ КОНТИНЕНТАЛЬНОСТИ КЛИМАТА В ХАКАСИИ 03.00.05 – БОТАНИКА Научный руководитель Ермаков Николай Борисович д.б.н., с.н.с. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Новосибирск - 2014 2 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ Актуальность исследования Цели и задачи исследования Защищаемые положения Научная новизна Практическая значимость Апробация работы и публикации Благодарности ГЛАВА 1. ...»

«Кочерина Наталья Викторовна АЛГОРИТМЫ ЭКОЛОГО-ГЕНЕТИЧЕСКОГО УЛУЧШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ Специальность 03.00.15 – Генетика Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук, профессор, академик РАСХН В. А. Драгавцев Санкт–Петербург – 2009 2 Оглавление Глава I. Введение…………………………………………………….……….…4 О реальной природе организации сложных полигенных экономически важных признаков растений…….……………………9 Глава II. Постановка задач ...»

« ГАЛКИНА МАРИЯ АНДРЕЕВНА БИОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ИНВАЗИОННЫХ ВИДОВ РОДА BIDENS L. В ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ 03.02.01 – БОТАНИКА ДИССЕРТАЦИЯ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК Научный руководитель д.б.н. Виноградова Ю.К. Москва – 2014 2 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение ……………………………………………………………………….4 Глава 1. Объекты и методы ………………………………………………….10 Глава 2. История распространения инвазионных видов рода Bidens L. на территории Европы …………………………………… Глава 3. ...»

« Никитенко Елена Викторовна МАКРОЗООБЕНТОС ВОДОЕМОВ ДОЛИНЫ ВОСТОЧНОГО МАНЫЧА 03.02.10 – гидробиология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Щербина Георгий Харлампиевич Борок – 2014 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ 3 ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8 ГЛАВА 2. ФИЗИКО–ГЕОГРАФИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАЙОНОВ ИССЛЕДОВАНИЯ 17 ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 36 ГЛАВА 4. МАКРОЗООБЕНТОС ВОДОЕМОВ ДОЛИНЫ ВОСТОЧНОГО ...»

« Вознийчук Ольга Петровна ПРОСТРАНСТВЕННАЯ СТРУКТУРА И ОРГАНИЗАЦИЯ НАСЕЛЕНИЯ НАЗЕМНЫХ ПОЗВОНОЧНЫХ ЦЕНТРАЛЬНОГО АЛТАЯ 03.02.04 – зоология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Ю.С. Равкин Горно-Алтайск – 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………….….….4 ГЛАВА 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ, РАЙОН РАБОТ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ………………………….…………………………….…………….….9 1.1. История изучения фауны Центрального ...»

« ТОКРАНОВ АЛЕКСЕЙ МИХАЙЛОВИЧ ОСОБЕННОСТИ БИОЛОГИИ ДОННЫХ И ПРИДОННЫХ РЫБ РАЗЛИЧНЫХ СЕМЕЙСТВ В ПРИКАМЧАТСКИХ ВОДАХ 03.00.10 – ихтиология Диссертация в виде научного доклада на соискание ученой степени доктора биологических наук Петропавловск-Камчатский – 2009 2 Официальные оппоненты: доктор биологических наук, член-корреспондент РАН Черешнев Игорь Александрович доктор биологических наук Долганов Владимир Николаевич доктор биологических наук, профессор Шунтов Вячеслав Петрович ...»







 
© 2013 www.dis.konflib.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.